张茂林1, 夏伦果1, 陈蕾2, 张秀丽3, 蒋欣泉3, 张志愿1
目的:应用硅酸钙(CaSiO3, CS)生物陶瓷作用于人牙髓细胞(human dental pulp cells, hDPCs),研究其对hDPCs增殖及向成牙本质细胞方向分化的影响。方法:从年轻健康患者(18~20岁)拔除的智齿或前磨牙牙髓组织中获取hDPCs进行培养。将质量浓度为0.2 g/mL的CS浸提液按1/2、1/4、1/8、1/16、1/32、1/64和1/128倍比稀释后作用于hDPCs。MTT实验检测不同质量浓度CS浸提液对hDPCs增殖的影响,进而筛选出最佳浓度。以最佳质量浓度(1/64倍比稀释)CS浸提液培养hDPCs 2、4 d后,Real?鄄Time PCR检测以下hDPCs成牙本质相关基因的表达:牙本质涎磷蛋白(dentin sialophosphoprotein, DSPP)、牙本质基质蛋白?鄄1(dentin matrix protein 1, DMP?鄄1),Ⅰ型胶原(collagen typeⅠ, COL?鄄Ⅰ)、骨钙蛋白(osteocalcin, OCN)、骨桥蛋白(osteopontin, OPN);培养7、14 d后碱性磷酸酶(alkaline phosphatase, ALP)染色及半定量检测ALP活性。结果:最佳质量浓度(1/64倍比稀释)CS浸提液能够促进hDPCs的增殖,对牙髓细胞 DSPP、DMP?鄄1、COL?鄄1、OPN等成牙本质相关基因的表达有较为明显的促进作用。ALP染色及半定量分析显示该浓度的CS浸提液能够提高hDPCs分泌ALP的活性。结论:最佳质量浓度(1/64倍比稀释)CS浸提液能够明显促进hDPCs的增殖,提高成牙本质相关基因的表达,进而促进hDPCs向成牙本质细胞方向分化,为后期hDPCs结合CS支架材料进行牙本质再生的研究打下基础。