目的: 探究基因间区长链非编码RNA-EPS(long intergenic noncoding RNA,lincRNA-EPS)对脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)诱导的小鼠牙周膜细胞(mouse periodontal ligament cells,mPDLCs)炎症因子表达的影响。方法: 使用CRISPR/Cas9技术构建lincRNA-EPS基因敲除的C57BL/6J小鼠。分离培养野生型及lincRNA-EPS基因敲除型mPDLCs,并进行免疫荧光鉴定。制备纳米粒材料,搭载lincRNA-EPS过表达质粒,并测定转染效率。设立5个实验组:野生型对照组(WT组)、野生型刺激组(WT+LPS组)、敲除型对照组(KO组)、敲除型刺激组(KO+LPS组)和挽救实验组(KO+LPS+lincRNA-EPS组)。在WT+LPS组、KO+LPS组及KO+LPS+lincRNA-EPS组中添加100 ng/mL的LPS,刺激6 h,其中,在KO+LPS+lincRNA-EPS组中提前加入lincRNA-EPS过表达质粒进行转染。WT组及KO组不做处理。利用实时荧光定量聚合酶链式反应(quantitative real-time polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测各实验组炎症因子cxcl10、cxcl12、cxcl14、IL-1α、IL-6 mRNA的表达量。应用酶联免疫吸附测定技术(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)测定各组炎症因子cxcl10、IL-1α、IL-6的蛋白水平。结果: 成功构建了lincRNA-EPS基因敲除的C57BL/6J小鼠模型;搭载lincRNA-EPS过表达质粒的纳米粒成功转染了mPDLCs,转染效率接近20%;在无LPS刺激的状态下,KO组的炎症因子表达水平较低,且与WT组无差异(P>0.05),lincRNA-EPS基因的缺失不会导致mPDLCs炎症因子基础表达量的改变;LPS刺激6 h后,KO+LPS组和WT+LPS组相较于各自的对照组,各个炎症因子的表达均上调(P<0.05),且KO+LPS组相较于WT+LPS组,各炎症因子表达上调更为显著(P<0.05),说明lincRNA-EPS缺失的mPDLCs受到LPS刺激时,更易引发强烈的炎症因子表达;KO+LPS+lincRNA-EPS组相较于KO+LPS组,炎症因子的表达量下调(P<0.05),可见外源性lincRNA-EPS的转入在一定程度上抑制了炎症因子的表达。结论: lincRNA-EPS对LPS诱导的mPDLCs炎症因子表达起负向调控作用。
目的: 通过组织工程策略构建顺序释放骨形态发生蛋白(bone morphogenetic protein, BMP)和WNT信号通路激活剂的双层复合材料,并研究其在体外对成骨细胞分化的作用。方法: 用CCK-8法、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase, ALP)染色法和茜素红染色法分别检测BMP信号通路激活剂他克莫司(tacrolimus, FK506)和WNT信号通路激活剂6-溴靛玉红-3-肟(6-bromoindirubin-3-oxim, BIO)对前成骨细胞系MC3T3-E1增殖活性和成骨向分化的影响,筛选出最合适的药物浓度;制备壳聚糖/海藻酸钠支架材料,采用称量法测定材料的降解曲线,制备内层壳聚糖载BIO、外层海藻酸钠载FK506的支架材料,采用紫外分光光度计测定药物的释放;制备内外单载不同药物的支架材料,用ALP染色法和茜素红染色法检测载药复合材料对前成骨细胞系MC3T3-E1成骨向分化的作用,应用实时定量聚合酶链式反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)法检测载药支架材料对前成骨细胞系MC3T3-E1成骨相关基因表达的影响。结果: 在适宜范围内,FK506处理的细胞早期ALP活性较BIO处理的细胞更强,且FK506促进ALP活性最适合的质量浓度为2.0 μg/mL;茜素红染色结果表明,BIO在0.1 μmol/L时,细胞表现出更强的钙结节形成能力。支架材料缓慢稳定降解至第35天,期间FK506和BIO顺序释放,药物在14 d内基本释放完毕。应用载药材料浸提液ALP染色的支架材料和茜素红染色结果显示,内载BIO外载FK506的实验组相比较于其他组表现出更强的成骨向分化能力; RT-qPCR结果显示,内载BIO外载FK506的支架材料能够显著促进成骨相关基因Runx2和OCN的表达。结论: 以壳聚糖/海藻酸钠为支架材料,内层壳聚糖载WNT信号通路激活剂BIO,外层海藻酸钠载BMP信号通路激活剂FK506,两者顺序释放,即先激活BMP信号通路,后激活WNT信号通路,能够在体外促进MC3T3-E1细胞的成骨向分化,为临床治疗骨缺损,促进骨再生提供新思路。
目的: 探讨不同代数SD大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)体外增殖和成骨分化能力的差异。方法: 从SD大鼠骨髓中分离并培养原代BMSCs,免疫荧光染色鉴定BMSCs。传代培养分别获取P1、P3、P5、P7、P9代BMSCs。CCK-8实验检测不同代数BMSCs的增殖能力;显微镜下观察细胞形态学特征;免疫荧光染色检测细胞骨架;流式细胞术检测细胞凋亡情况;碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)染色和茜素红染色比较不同代数BMSCs的体外成骨分化能力;实时聚合酶链式反应(real-time polymerase chain reaction,RT-PCR)和免疫荧光检测不同代数BMSCs成骨分化标志物Ⅰ型胶原A1(collagen type Ⅰ α1,COL1A1)、骨钙素(osteocalcin,OCN)基因表达和蛋白水平。结果: P1、P3、P5代间BMSCs的细胞形态、体外增殖、细胞凋亡及成骨分化能力无显著差别;而P7和P9代BMSCs各方面指标与P1代BMSCs比较,均明显降低(P<0.05)。结论: 5代以后的BMSCs随着传代次数的增加,其细胞增殖和成骨分化能力显著降低。
目的: 探讨右美托咪定对口腔癌术后患者留置气管导管耐受性的影响。方法: 选取口腔癌手术患者80例,随机分为正常对照组(N组)和右美托咪定组(D组),每组各40例。2组均行常规麻醉诱导和维持,D组于麻醉诱导前给予1 μg/kg负荷剂量的右美托咪定,术中泵注0.2~0.6 μg/(kg·h)右美托咪定维持麻醉,术毕镇痛泵内给予1 μg/kg剂量的右美托咪定;N组右美托咪定的负荷量、维持量及镇痛泵中的用量均用等量0.9%氯化钠溶液代替。记录术后12 h内2组患者Ricker镇静-躁动评分(Ricker sedation agitation score, SAS)及呛咳、躁动和自行拔管的发生率;记录围术期血糖水平;记录低氧血症和血流动力学情况。结果: 与N组相比,D组术后2、6 h时的 SAS评分低(P<0.05),术后12 h内呛咳、躁动发生率,高血压、心动过速发生率低,而心动过缓发生率高(P<0.05),围手术期的血糖水平低(P<0.05)。2组术后12 h 时的SAS评分,术后12 h内的自行拔管率、低氧血症及低血压发生率差异无统计学意义(P>0.05)。结论: 口腔癌手术患者于围术期使用右美托咪定能够增加术后留置气管导管的耐受性,降低围术期血糖水平,稳定血流动力学,但是要警惕心动过缓的发生。
目的: 分析基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)在成釉细胞瘤中的表达,比较其在成釉细胞瘤各病理类型间的差异及与侵袭性的关系。方法: 收集2005—2009年于北京大学口腔医院手术所得成釉细胞瘤石蜡标本26块,对标本进行免疫组织化学(免疫组化)染色。MMP-2为一抗,在高倍镜下观察,因细胞较少,深褐色区域>50%为强阳性,26%~50%为中等阳性,5%~25%或仅有少量斑点为弱阳性,<5%为阴性。数据处理采用χ2检验。结果: MMP-2表达总阳性率为88.5%,强阳性率为65.4%,阴性率为3.8%。在肿瘤外周柱状细胞、基质细胞等细胞内均可见MMP-2的表达。结论: MMP-2与成釉细胞瘤的局部侵袭性相关,各病理类型间MMP-2表达无显著差异。
目的: 探讨股前外侧皮瓣携带肌瓣和/或脂肪瓣在口腔颌面部缺损重建中的应用。方法: 收集自2014年1月—2018年12月,连云港市第一人民医院口腔科应用股前外侧皮瓣携带肌瓣和/或脂肪瓣修复口腔颌面部肿瘤切除术后的复杂缺损20例,记录皮瓣的类型与面积,供区、受区并发症,患者术后生存质量等情况。结果: 所有皮瓣均存活,术后未发生血管危象。术后1例颊癌患者因涎瘘出现伤口积液,另1例出现口底瘘,换药后伤口均愈合。供区伤口仅留下线性瘢痕,术后1例出现伤口积液,经换药后伤口愈合,无感染、血肿等并发症出现。随访3~24个月,患者对面部外形及功能恢复满意。结论: 股前外侧皮瓣及其嵌合皮瓣可用于填塞口腔颌面部肿瘤切除术后留下的各种死腔,覆盖钛板及颈部大血管等,能有效地预防和减少术后并发症的发生。
目的: 探讨锥形束CT(cone-beam computed tomography, CBCT)联合3D打印制作的个性化牙模型在上、下颌第三磨牙移植修复缺失磨牙病例中的临床疗效。方法: 收集2017年5月—2019年4月在温州医科大学附属口腔医院上、下颌第一或第二磨牙缺失并需拔除第三磨牙的46例病例(52颗牙)。按照手术方式分组,对照组(25例,28颗牙)采用传统移植方案,观察组(21例,24颗牙)应用CBCT术前分析结合3D打印模型进行术前牙槽窝预备后即刻移植。术后1年复查,拍摄X线片,对患者满意度、移植牙松动情况、牙周探诊深度、牙根吸收情况,以及疗效进行统计。结果: 观察组患者满意度明显高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。观察组移植牙松动度分级、牙周探诊深度分级、牙根吸收情况分级明显低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。观察组移植牙疗效评价明显高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论: 在临床自体牙移植病例中,3D打印牙模型的应用有效提高了移植牙的成功率,可以作为一种新的治疗方案应用于临床牙列缺损的病例。
目的: 应用血管化自体下颌下腺移植的方法治疗重症角结膜干燥症,并评价其疗效。方法: 纳入重症角结膜干燥症患者4例,将患者下颌下腺移植至颞部,完成血管吻合,并将移植腺体导管重新开口于患眼。术后监测移植腺体血运并调控其分泌功能,对患眼治疗效果进行评估。结果: 2017—2019年共治疗了4例患者的5只眼,其中1例接受双侧眼部手术。所有患者手术均获成功,核素显像证实移植腺体均成活。经术后功能调控治疗,移植腺体分泌适当。随访结果显示:希尔默试验由术前的0 mm/5 min升至术后的15 mm/5 min;眼表结构改善明显,泪膜破裂时间由术前的0 s增加至术后6 s;患者角膜荧光染色评分降低,视力出现不同程度的提高。主观评价结果显示,患者术后眼干症状改善,所有患者均停止使用人工泪液。结论: 在具备显微外科技术的条件下,自体下颌下腺移植手术的成功率较高,是治疗重症角结膜干燥症的有效方法。
目的: 观察与研究选择性颈部淋巴结清扫术对于cT1N0M0期舌鳞状细胞癌的疗效及其与肿瘤浸润深度、分化程度,患者生存情况、生存率的关系。方法: 回顾36 例cT1N0M0期舌鳞状细胞癌患者的资料,将患者分为选择性颈部淋巴结清扫组(选择性颈清组,23例)和观察组(13例)。对患者的临床病历、随访资料、病理结果等进行分析。结果: 36例病例5年生存率达97.2%,其中1例于术后52个月时死亡;23例选择性颈清组隐匿性颈部淋巴结转移率为0%;观察组病理分级为Ⅲ级、浸润深度为4~5 mm的患者,5年生存率为50%。结论: 选择性颈部淋巴结清扫术和颈部随访观察2种颈部处理方法对cT1N0M0期舌鳞状细胞癌患者的生存状态、生存率影响无明显差异(P>0.05),肿瘤的分化程度、浸润深度是实施选择性颈淋巴结清扫术的重要参考依据和影响生存率的危险因素。
固有免疫应答的特点是在病原刺激下,细胞内信号快速级联,为机体提供抗感染的最初防御。长链非编码RNA(long noncoding RNA,lncRNA)作为非编码RNA领域中的新星,是固有免疫的重要调节剂,与炎性疾病的病程密切相关。牙周炎是造成成年人牙齿缺失的主要原因,涉及牙周组织对病原体的固有免疫应答和级联炎症反应,它的发生、发展也与lncRNA有关。现就lncRNA参与固有免疫的作用及其与牙周炎症反应关系的研究进展作一综述。
在骨早期发育过程中,尤其在胚胎发育过程中,组织低氧微环境对维持细胞分化能力具有重要作用。在骨形成后,手术、创伤及炎症等造成的局部低氧微环境对骨改建具有重要影响。成骨细胞、成软骨细胞及破骨细胞等骨系细胞的前体细胞均属于氧感应细胞,参与骨形成及骨改建的关键环节。作为对局部氧环境进行感受和应答的核心分子,低氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)在骨形成及骨改建中的作用值得深入探讨。本文就HIF-1α与骨改建关系的研究现状作一综述。
口腔癌是一种常见的恶性肿瘤,手术及相关治疗都易导致术后发生吞咽困难,极大地影响患者生活质量及预后。因此,准确诊断和及时治疗吞咽困难非常重要。本文针对目前口腔癌手术致吞咽困难的相关因素及临床上常见的评估方法、护理手段作一综述,为口腔癌术后吞咽困难患者的功能恢复提供重要参考。
目的: 探讨异位甲状腺的临床特点、诊断及治疗,以减少临床上异位甲状腺的误诊及漏诊。方法: 回顾性分析徐州市中心医院口腔科1例舌根部异位甲状腺的临床表现、诊治依据及治疗方案,结合文献总结其临床诊疗思路。结果: 根据临床表现及影像学检查结果,该患者被诊断为舌根部异位甲状腺。因患者无明显吞咽、呼吸功能障碍,且甲状腺区无甲状腺,遂未行治疗,密切随访。结论: 异位甲状腺多因位置及形态的不确定容易漏诊或误诊,临床上应高度重视,并采用多种诊断方法相结合的方式来减少误诊或漏诊的发生。